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생명과학/분자생물학

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원핵생물의 DNA 전사 (Transcription) 유전자DNA 서열에서 유전 정보가 담긴 부분조절 부위(전사를 조절함) + 암호화 분위(RNA로 전사됨)로 이루어짐 원핵생물(i) 프로모터조절 부위 중 RNA 합성효소가 처음 붙는 자리일반 유전자들의 프로모터 서열 : -35, -10 부위의 짧은 염기서열들로 이루어짐>'RNA 합성효소 + σ' 이 염기서열들을 인식해 결합함 *일치(cosensus) 서열DNA, RNA, 단백질들에서 유사하게 반복적으로 나타나는 염기서열이나 아미노산 배열 *프리나우 박스전사 개시 위치에서 약 -10 염기서열 떨어진 곳에 있는 'α2αββ' + σ'이 결합하는 진정 세균 프로모토의 일부 서열 (ii) RNA 합성효소 α2αββ' 핵심 효소 + σ 인자 → 완전 효소 α2 C말단 : 몇몇 프로모터의 -60, -40 분위에 있는 ..
PCR(Ploymerase chain reaction) - 재료과 매커니즘 PCR 시험관에서 특정 DNA 절편을 대량으로 증폭하는 실험법 (i) 시험관 내 DNA 복제 헬리케이스를 넣는 대신 가열해서 이중가닥 DNA를 외가닥으로 벌림 DNA 프라이머 세트를 합성해서 넣고, DNA 합성효소와 dNTP를 처리해 복제를 진행함 > 가열을 하면 이전 사이클에 넣었던 DNA 합성효소는 변성되기 때문에, DNA를 여러 번 복제하려면 매 사이클마다 새로 효소를 넣어야 하는 번거로움이 있음 (ii) 현재의 PCR 기법 시험관 내 DNA 복제 과정을 개선하기 위해 Thermus aquaticusdptj DNA 합성효소를 추출함 -Taq : 고온에서도 변성되지 않기 때문에 매 사이클마다 새로 효소를 넣어줄 필요가 없음 PCR재료 DNA주형, dNTPs, Taq DNA 합성효소, DNA 프라이머 ..
DNA의 복제과정 메커니즘(개시,진행,종결) - 원핵생물 *DNA 합성효소 앞에 3'-OH가 있어야 합성을 시작할 수 있음 항상 5'→3'으로 합성함 (i) DNA 합성효소 Ⅲ 긴 가닥 DNA 합성, 5'→3' 합성효소 활성, 3'→5' 핵산 말단 가수분해효소 활성 지님 (ii) DNA 합성효소 Ⅰ 짧은 가닥 DNA 합성, 주로 DNA수선에 관여 큰 소단웨체 : 5'→3' 합성효소 활성 3'→5'핵산 말단 가수분해효소 활성 지님 작은 소단위체 : 5'→3' 핵산 말단 가수분해효소 활성 지님 (iii) DNA 합성효소 Ⅱ DNA 수선에 관여 5'→3' 합성효소 활성, 3'→5'핵산 말단 가수분해효소 활성 지님 *헬리케이스 외가닥 DNA에 붙어 한 방향으로 이동하면서 앞에 있는 염기쌍들을 차례로 외가닥으로 벌림 ATP사용 -대장균에는 5'→3', 3'→5' 헬리케..