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ex-vivo confocal microscopy trouble shooting ex-vivo brain에 neutrophil을 보기 위해 set up중임. Issues. 1. ly6G(neutrophil) - RPF channel 에 pseudo signal이 너무 강함. - RPF signal이 neutrophil이 맞는지 검증 불가 2. brain cortex에 항체가 모여서 brain 내부로 못들어가는 것처럼 보임. 3. image 퀄리티가 심하게 떨어져 보임. ---나중에 이어서 업로드 예정---
세포동결보존 (+DMSO) im HBMEC 1일차 im HBMEC 2일차 2일차에서 trypsin 처리후 5분 후 모습 기억나는대로 적어보자면 1. 세포가 계대배양 할만큼 충분히 자랐는지 확인하기 2. 배양액을 버리고 DPBS로 한번 헹궈주기 3. trypsin 3ml 넣고 배양기에 5분 배양 4. 사용하는 media로 typsin 중성화 시키기 5. 세포와 배양액 2개 tube에 나눠담아 centrifuge 2500 rpm, 5분 돌리기 6. 상층액은 버리고 동결보존용 배지 (DMSO와 FBS 혼합)에 cell 풀어주기 7. 10cm plate 1개당 2개 vial 로 계산하여 6개(1개 vial 당 배지 0.5ml) vial 준비하고 이름,날짜,세대 주기하기 8. vial을 freezing container에 넣고 deep f..
세포배양 - 트립신(trypsin), cell passaging(계대배양), EDTA 세포배양시에는 항상 오염을 주의하자. 지금 키우는 세포는 Imortalized human drieved brain endothelial cell 세포가 바닥에 붙어서 자라기 때문에 trypsin으로 떼어준다. (5분간 배양기에 넣어두기) 이후 trypsin 과 동일 양의 배지 buffer를 넣어서 trypsin 활성 중지 시킨다. 이 후 centrifuge 2500 rpm, 10분간 돌려주어 cell을 모아서 새배지에 골고루 잘 퍼지도록 해준다. 이 때, 얼마의 배지에 cell을 풀어줄지는 계대배양을 몇 개의 플레이트에 할 것인지와 실험용으로 빠질 양도 생각하여 배지에 풀어 준다. 예를 들어, 저번주 금요일에 5개 플레이트에 키운 세포를 30ml tube에 풀어줬고, 6 well plate 에 2ml씩 ..
Asia pacific storke conference in hongkong
Japan & Korea joint stroke conference In busan (+poster presentation award)
단백질 - (아미노산, 폴리펩티드구조) 단백질 다양한 기관, 효소, 호르몬 등 신체를 이루는 주성분으로, 몽에서 물 다음으로 많은 양을 차지함 1. 아미노산 -단백질의 기본 단위 물질 -주로 체내 구조 물질로 사용, 에너지원으로는 드믈게 씀 (i) 종류 R기에 따라 20가지로 나뉨 -비대칭 탄소가 없는 글리신을 제외하고, 생체 내 대부분의 아미노산은 L-형으로 관찰됨 필수 아미노산 : 인체가 직접 합성할 수 없어 꼭 섭취해야 함 -Ile, Val, Met, Thr, Phe, Leu, Trp, Lys, His (ii) 아미노산의 성질 등전점(Isoelectric point) : 물질의 알짜 전하가 0이 되는 pH 값 아미노산은 pH에 따라 -전하, +전하 , 중성 으로 존재할 수 있다. 이때 아미노산의 전하가 0인 경우가 되는 pH가 등전점이다..
동물의 발생 과정 - 난할(과정,종류) 1.난할의 과정 수정된 배아는 모계 유래 mRNA나 단백질들의 조절에 의해 세포 분열을 진행함 -세포 분열 속도와 할구 위치 등을 조절함 G1,G2기 없이 세포 분열이 진행되기 때문에, 전체 배아의 크기는 일정하지만 분열할수록 각 할구의 크기는 작아짐 -모계 유래 mRNA에서 사이클린 B가 번역되면 MPF 활성이 나타나서 M기에 들어서고 사이클린 B가 분해되면 S기에 들어섬 난할은 대게 각 세포들에서 동시에 일어남 열 번 이상의 난할이 일어나면 포배기(Blastula)로 이행함 -배아 핵에서 유전자들이 발현돼서 새로 합성된 단백질들이 각 세포들의 분화에 영향을 줌 -세포주기에 G1,G2기가 추가됨 -세포 분열의 동시성이 사라져서 각각 따로 분열함 2.난할의 종류 종마다 난황의 양과 위치, 세포 분열 시 ..
동물의 발생 과정 - 수정(배우자 구조, 수정과정) 수정 부모 각각에게 물려받은 염색체를 지닌 두 배우자가 서로 융합하는 과정 1. 배우자의 구조 (i) 정자 세포질 성분의 대부분을 잃고 정자 기능 수행에 필요한 최소한의 구조물들만 지님 전핵 : 유선형 모양으로 반수체 DNA가 응축되어 있음 첨체 : 골지체 유래, 전핵 앞에 위치하며 난자의 젤리층이나 투명대를 분해하는 가수분해 효소들을 지님 미세섬유 : 첨체와 전핵 사이에 위치하며 첨체돌기를 형서하는데 관여함 중심립 : 편모 형성의 중심부 역할을 하며, 수정 후 수정란에서 중심체를 형성함 미토콘드리아 : (9+2)식 구조의 편모가 운동할 수 있도록 ATP를 공급함 (ii) 난자 양분으로 쓰일 난황 단백질, 초기 발생에 필요한 리보솜, tRNA, mRNA, 발생 및 분화 유도인자들, DNA 수선 효소 등을..